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介绍息争释实验室仪器的事情原理、操作步骤、维护调养、技术规范、应用案例等内容
问题一、什么是非洲猪瘟？
非洲猪瘟(African Swine fever，ASF)是由非洲猪瘟病毒(African Swine fever virus，ASFV)熏染家猪和种种野猪(不熏染人)引起一种急性、出血性、烈性熏染病。其特征是发病历程短，最急性和急性熏染死亡率高达100%，且只能依靠实验室监测确诊。
2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。
问题二、目前在中国的熏染规模？
自8月初我国首次发现非洲猪瘟以来，截至11月22日，全国有20个省份47个市(区、盟)发生73起家猪疫情、1起野猪疫情，累计扑杀生猪60万头。全国非洲猪瘟疫情泛起多点散发状态，但在各地震物疾控部门的积极行动下，疫情开始趋于平稳，总体防控有效。
问题三、非洲猪瘟检测的样品处置惩罚要领介绍
一、非洲猪瘟样品处置惩罚
1. 目的
规范ASFV样品和实验质料的处置惩罚法式，保证ASFV相关实验的顺序开展和实验室的太阳成宁静。
2. 适用规模
适用于疑似ASFV临床样品的实验前的处置惩罚
3. 法式
3.1实验质料
ASF的易感动物，主要为家猪、野猪和蜱，通常收罗的样品为家猪、野猪的血液样品、组织样品以及蜱三类。田间收罗的样品通常需要经过简朴的预处置惩罚，才气进行后续的检测、诊断事情。
血清：用于病毒核酸检测、病毒抗原和抗体检测。将采好的猪血的注射器或采血管在室温下倾斜静止2~4h(防止暴晒)，或置于37℃温箱内1h，待大部门血清析出后，取出血清，须要时经离心疏散血清。(最低建议量5ml)。
抗凝全血：用于病毒核酸检测和病毒抗原检测。
采血前，在真空采血管或注射器内按比例加入抗凝剂。收罗血液，轻轻上下颠倒，使血液与抗凝剂充实混匀，防止血液凝固的同时制止溶血。也可以将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内，震荡脱落纤维卵白。须要时，可加入双抗以抑制血源性或采血历程中可能泛起的细菌污染。
当血样用于病毒核酸检测时，一般不用肝素而选用EDTA作为抗凝剂。(最低建议量1mL)。
组织样本：活体收罗，接纳扁桃体，用于临床康健动物ASF监测。
尸体剖检ASF发病动物或死亡动物经解剖取材，包罗：ASFV靶器官的收罗：脾脏、淋投合、肾脏、扁桃体。
其他病变组织脏器的收罗：收罗具有明显病变的肝脏、肺脏、心脏等组织器官，选取部位在病变和康健组织接壤处。
糜烂动物尸体的样品收罗：剖检取股骨，将附着的肌肉和韧带等全部剔除，收罗骨髓。最低建议量5克。
蜱的收罗：蜱可进行核酸检测、抗原检测和蜱的形态学判定，查找猪圈的墙边、墙缝、木质或瓦质的屋顶，或挖掘猪圈地面均可能找到蜱，也可检察猪表皮，收罗蜱。
1-1样品生存条件
注：用于病毒疏散和病理学检测的样品禁止-20℃生存。
3.2实验器材和试剂
台式高速冷冻离心机、组织研磨仪、水浴锅、计时器、冰箱和移液器等。
无菌的剪子、镊子、钢珠、2mLEP管、移液器吸头(10μL,200μL、1000μL)等。
其他试剂和耗材主要包罗：0.01mol/L PBS(PH7.2)、0.8%NaOH、75%酒精棉球等。
3.3样品处置惩罚法式
3.3.1血清及全血样品处置惩罚
取血清或全血样品1mL于灭菌EP管里，生存备用
3.3.2组织样品处置惩罚
适用于脾脏等组织样品和蜱的处置惩罚。尽可能淘汰污染，每取一个组织块或蜱，用火焰消毒剪镊等取样器械，组织块应划分放入灭菌容器内并立即密封，做好标志，注意防止组织间相互污染。
3.3.2.1组织样品的处置惩罚应在二级太阳成宁静柜中进行，勿使液体溅到太阳成宁静柜中
3.3.2.2将0.1-0.2g组织块放入2mLEP管中，用铰剪剪成碎块，加1-2mL0.01mol/L PBS(PH7.2),再加入1-2粒灭菌钢珠，密封后，外貌消毒备用。剩余样品放回容器内，重新密封，外貌消毒后生存-70℃冰箱。
3.3.2.3组织样品的破碎可以利用组织研磨仪在太阳成宁静柜外操作，将样品制成组织悬液。
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3.4病毒灭活
病毒的灭活处置惩罚应在二级太阳成宁静柜中进行，将处置惩罚好的血清、全血或者研磨破碎后的组织样品连同EP管放入60℃水浴中，放置30min灭活。
3.5使用后仪器处置惩罚
铰剪、镊子等均应放入消毒缸进行消毒，放入铁饭盒内，并装入密封袋内进行高压灭菌处置惩罚。装有组织样品生存液的容器和盛有组织块的离心管应密封管口，外貌消毒后放入密封袋中高压灭菌。钢珠、吸头等废弃物应用0.8%NaOH浸泡30分钟消毒后，置密封袋内高压灭菌。消毒残液应装入密封容器内高压灭菌处置惩罚。
3.6注意事项
操作之前要确认太阳成宁静柜和实验室已进行了彻底的卫生消毒处置惩罚，防止样品间交织熏染。
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